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【細胞密度】影響細胞培養(yǎng)的關鍵點分析
點擊次數:313 更新時間:2023-03-16

細胞培養(yǎng)是生物學研究中,一類重要的實驗方法。細胞養(yǎng)不好,細胞生物學研究也就無從談起。影響細胞培養(yǎng)狀態(tài)的因素有很多,細胞的密度,就是其中重要的一項。

通常,細胞密度是指每單位面積或體積的細胞數。

細胞培養(yǎng)的適宜細胞密度取決于特定的細胞類型和培養(yǎng)目的。不同的細胞由于來源不同,特性也會有所不同,有的細胞比較依賴于高密度才能生長,所以在進行復蘇、傳代等操作時需要注意。

生長速度慢的細胞,譬如內皮細胞,初始細胞密度略高一些,生長狀態(tài)會比較好;還有一些細胞生長速度比較快,如巨噬細胞或某些腫瘤細胞,初始細胞密度較低更有利于其狀態(tài)的調整。

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那么細胞密度究竟是如何影響細胞培養(yǎng)的?

首先,細胞密度直接影響細胞的生長速率。在細胞密度較低的情況下,細胞有更多的空間和養(yǎng)分供應,因此可以更快地生長和繁殖。但是,在細胞密度過高的情況下,細胞之間會發(fā)生競爭,養(yǎng)分和空間變得有限,導致細胞的生長速率減緩。因此,細胞密度應該適當控制,以保證細胞的生長速率和細胞數量的平衡。

其次,細胞密度還會影響細胞的分化。在細胞密度較低的情況下,細胞會傾向于分化為較多的類型,而在細胞密度較高的情況下,細胞則更可能傾向于保持未分化狀態(tài)。這是因為細胞在低密度情況下感受到更少的細胞-細胞相互作用,從而導致細胞分化。而在高密度情況下,細胞之間的相互作用增加,導致細胞更傾向于維持未分化狀態(tài)。

此外,細胞密度還會影響細胞的代謝。
在細胞密度較低的情況下,細胞需要更多的營養(yǎng)物質來維持其生長和繁殖,從而導致代謝速率的增加。但是,在細胞密度過高的情況下,細胞之間的相互作用和競爭增加,細胞需要更多的代謝產物才能生存和生長,從而導致代謝速率的降低。

在了解細胞密度對細胞培養(yǎng)的影響后,我們要做的就是將理論應用于實戰(zhàn)。細胞密度的調控可以通過改變細胞的種植密度、培養(yǎng)容器的大小以及細胞營養(yǎng)物質的供應量等多種方式來實現(xiàn)。

細胞接種密度的調整
細胞實驗過程中,常用血球計數板對細胞密度進行測定。隨著科技的發(fā)展,更為先進的細胞計數儀得到推廣,使得計算細胞密度更為高校和準確。

細胞培養(yǎng)容器的選擇
一般情況下,塑料器皿更適合生長速度比較慢的細胞,玻璃器皿更適合生長速度快的細胞;對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候(比如細胞剛復蘇時或者原代培養(yǎng)),塑料器皿的培養(yǎng)效果相對更好;而在其生長旺盛的時候,玻璃器皿則相對更好。

注意:以上情況只提供規(guī)律及思路,還需根據自身實驗具體情況而定。

細胞營養(yǎng)物質的供給
通過調整培養(yǎng)液的營養(yǎng)物質濃度和供應量來達到相應的細胞密度,根據細胞的生理特性,調節(jié)血清與基礎培養(yǎng)基的比例,或者各類生長因子與基礎培養(yǎng)基的比例,來調控細胞的生長速率,進而調控細胞密度。

細胞實驗需要用到胎牛血清。作為一種重要的添加成分,胎牛血清品質的優(yōu)劣,在一定程度上決定了細胞實驗結果是否理想。

遠慕生物供應進口特級胎牛血清,采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。富含各類的生長發(fā)育因子,理論上支持各種細胞的生長。出廠前均應經過嚴格質控,并附詳細《檢測報告》,血清從出廠,到實驗室,全程低溫冷鏈保護,盡可能避免血清反復凍融。

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