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遠慕分享:動植物細胞大量培養(yǎng)的培養(yǎng)方法
點擊次數(shù):311 更新時間:2023-04-04

大量培養(yǎng)動物細胞的方法可分為兩種:

①懸浮培養(yǎng),淋巴細胞和腫瘤細胞等能在液體培養(yǎng)基中懸浮生長。懸浮培養(yǎng)系統(tǒng),工業(yè)放大容易,成本低,不易受污染,可在帶螺旋槳或平槳攪拌的通用發(fā)酵罐中進行。

②大多數(shù)動物細胞需要附著在一定的固定表面上才能增殖,因此稱單層培養(yǎng)。單層培養(yǎng)的突出問題是提供細胞生長所需的表面積。迄今為止應用最guang泛的是滾瓶法,滾瓶是平放的玻璃瓶,內盛培養(yǎng)基,細胞在其內壁上附著生長,隨著瓶子滾動細胞間歇地接觸空氣和培養(yǎng)基。此外,最you效地提供比表面積(表面積/培養(yǎng)基體積)的是微珠法。微珠的直徑為40~250μm,當1mg微珠懸浮在1ml培養(yǎng)基上時,能提供的表面積大于5cm2。另一種能提供較大的比表面積的載體為中空纖維,一般結構是把纖維管束裝置在圓筒內,培養(yǎng)基一般在管間流動,細胞在管內外壁表面上生長,氣體可通過中空纖維管擴散至培養(yǎng)基中。

如何判斷一種細胞的生存狀態(tài)好壞

貼壁細胞在生長狀態(tài)良好時,細胞均質而透明,細胞內顆粒少,看不到空泡,細胞邊緣清楚,培養(yǎng)基內看不到懸浮的細胞和碎片,培養(yǎng)液清澈透明。

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