正確進(jìn)行培養(yǎng)基質(zhì)量控制,并作為一項(xiàng)經(jīng)常性的工作,建立完整的檢驗(yàn)資料,是實(shí)驗(yàn)室今后通過(guò)相應(yīng)級(jí)別的認(rèn)證,在整個(gè)檢驗(yàn)質(zhì)量控制體系中所必須具備的文件資料。
1、常用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制
檢驗(yàn)項(xiàng)目與方法:對(duì)新批號(hào)的干燥培養(yǎng)基物理、化學(xué)及生物學(xué)指標(biāo)鑒定。
A:感官(外觀)研細(xì)程度和顏色(溶解前后),透明度,雜質(zhì)等。
B:PH測(cè)定,按各種培養(yǎng)基要求的PH±0.2,蒸餾水的PH應(yīng)在6.4-7.0之間。
C:生物學(xué)指標(biāo)檢定,被檢培養(yǎng)基相應(yīng)細(xì)菌生長(zhǎng)率測(cè)試;菌落大小及特征的檢測(cè)。
生長(zhǎng)率測(cè)試:適用與液體和固體培養(yǎng)基:將菌培養(yǎng)液,用生理鹽水做倍比稀釋,取合適稀釋度進(jìn)行平板計(jì)數(shù)或接種被檢的培養(yǎng)基試管,同時(shí)以按相關(guān)的培養(yǎng)基國(guó)標(biāo)配方新鮮配制的培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照。不低與10%。
菌落大小測(cè)試:劃線分離測(cè)試菌,取10個(gè)菌落測(cè)量直徑大小,其直徑均值與新鮮配制的培養(yǎng)基無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
2、常用培養(yǎng)基質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
外觀和理化標(biāo)準(zhǔn):
干粉顏色:淡黃色粉末或呈現(xiàn)本培養(yǎng)基te有的顏色。
溶解后培養(yǎng)基色澤:清晰透明(含瓊脂除外)淡黃色或te有的色澤。
滅菌后的培養(yǎng)基PH:7.2±2℃為多;個(gè)別弧菌檢驗(yàn)用培養(yǎng)基pH值偏高為:8.0 ±2℃。
生物學(xué)指標(biāo):菌落特征及菌落大小 。
3、培養(yǎng)基保存環(huán)境
制成的培養(yǎng)基保存環(huán)境為4℃冰箱,如制成平板則用塑料袋包裝置冰箱保存。
干燥培養(yǎng)基干粉含有活性物質(zhì)、遇熱易分解的物質(zhì)應(yīng)仔細(xì)查看存放條件,多數(shù)也須放在2-8 ℃條件保存。
有的培養(yǎng)基則以存放于10-15 ℃條件為易。如含有高濃度膽鹽的培養(yǎng)基。
4、培養(yǎng)基制備控制程序
培養(yǎng)基配制所用的儀器設(shè)備培養(yǎng)基配制所用的儀器設(shè)備必須經(jīng)過(guò)相應(yīng)的鑒定 。
配制培養(yǎng)基所用的用具及容器配制培養(yǎng)基所用的用具及容器必須是清潔或是滅菌的,一些特殊不易洗刷清潔的玻璃器皿,必要時(shí)可用重鉻/酸鉀硫酸清潔浸泡后,取出置5%氫氧/化鈉溶液浸泡數(shù)分鐘,再用3%鹽酸溶液進(jìn)行中和,然后用清水沖洗,烘干后備用。
5、培養(yǎng)基配制原料,試劑質(zhì)量控制
配制好的培養(yǎng)基(尤其是糖發(fā)酵管)不宜久放。因?yàn)榕囵B(yǎng)培養(yǎng)基吸收空氣中的二氧化碳,會(huì)使培養(yǎng)基變酸,從而影響細(xì)菌的生長(zhǎng)。
培養(yǎng)基中的抑制劑及指示劑一定要精確稱量,抑制劑要注意合理配伍。
6、培養(yǎng)基主要原料的質(zhì)量控制
配制培養(yǎng)基的主要原料有蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏、膽鹽、無(wú)機(jī)鹽和瓊脂等,這些主要原料的有劣,直接影響到培養(yǎng)基的質(zhì)量,由此也將影響檢驗(yàn)質(zhì)量。