細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物技術(shù)中最核心基礎(chǔ)的技術(shù)。所以這也是每個(gè)科研技術(shù)人員必須會(huì)的一項(xiàng)技能!那么在培養(yǎng)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)之前您知道需要做哪些準(zhǔn)備工作么?今天為大家整理了一些相關(guān)資料,下面分享給大家!
實(shí)驗(yàn)人員的無(wú)菌準(zhǔn)備:
1.肥皂洗手。
2.穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋
3.用75%酒精棉球擦凈雙手。
無(wú)菌操作的演示:
1.凡是帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋-白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面
2.靠近酒精燈火焰操作。
3.器皿使用前必須過(guò)火滅菌
4.繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處,使用時(shí)仍要過(guò)火。
5.各種操作要靠近酒精燈,動(dòng)作要輕、準(zhǔn)確,不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。
6.吸取兩種以上的使用液時(shí)要注意更換吸管,防止交叉污染。
準(zhǔn)備室的設(shè)備:
單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲(chǔ)品柜(放置未消毒物品)、儲(chǔ)品規(guī)(放置消毒過(guò)的物品)、包裝臺(tái)。配液室的設(shè)備:扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(jì)(測(cè)量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液)。
培養(yǎng)室的設(shè)備:
液氮罐、儲(chǔ)品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-80℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(tái)(書(shū)寫(xiě)實(shí)驗(yàn)記錄)。必須放在無(wú)菌間的設(shè)備:離心機(jī)(收集細(xì)胞)、超凈工作臺(tái)、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機(jī)、4℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。
無(wú)菌室的滅菌:
1.定期打掃無(wú)菌室:每周打掃一次,先用自來(lái)水拖地、擦桌子、超凈工作臺(tái)等,然后用3‰來(lái)蘇爾或者新潔爾滅或者0.5%過(guò)氧乙酸擦拭。
2.CO2孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%過(guò)氧乙酸,再用紫外燈照射
3.實(shí)驗(yàn)前滅菌:打開(kāi)紫外燈、三氧殺菌機(jī)、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘
4.實(shí)驗(yàn)后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺(tái)、邊臺(tái)、倒置顯微鏡的載物臺(tái)。