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全血、血清、血漿樣本在DNA檢測過程中的區(qū)別
點擊次數(shù):763 更新時間:2022-04-13

 很多的血液類DNA提取試劑盒在適用樣本上都會寫上全血、血漿、血清均可適用,所以很多老師在做核酸診斷類的實驗時,就認(rèn)為這三種樣本都可以使用,選擇比較隨意,但是得到的結(jié)果往往并不盡如人意,那么這三種樣本有什么區(qū)別,對核酸診斷實驗有什么影響呢?

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簡單來說,血漿是全血的一部分,血清是血漿的一部分。全血包括血漿和血細(xì)胞(紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板),血漿包括血清和纖維蛋白原。

從核酸診斷的角度來講,人的基因組DNA更多的存在于白細(xì)胞中,而只有少量游離DNA存在于血清中,但如果白細(xì)胞大量凋亡,血清中的游離DNA量會有所增加。而具有致病性的病原體核酸大量存在于血清中,幾乎不存在于血細(xì)胞中。

所以,如果是以人的核酸為檢驗?zāi)繕?biāo),如篩查地中海貧血癥,篩查色盲基因等,應(yīng)該以全血作為實驗樣本,因為血清和血漿中所含有的人的核酸數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于全血,檢測靈敏度會降低很多。

而如果是以病原體核酸為檢驗?zāi)繕?biāo),如檢測乙肝感染情況,檢測感冒病毒等,則以血清或血漿為實驗樣本,這會天然地剔除血細(xì)胞這種雜質(zhì),明顯降低核酸提取過程中的難度,有利于提高核酸純凈度,增加檢測反應(yīng)靈敏性和穩(wěn)定性。

而血清和血漿相比,一方面血清中含有更少的纖維蛋白原,一方面血清中的DNA是循環(huán)DNA,主要來源于病變組織,所以使用血清作為實驗樣本,可以更進(jìn)一步提高樣本純凈度,減少蛋白雜質(zhì),提高病原體濃度,獲得更為靈敏的檢測結(jié)果。

對于試劑盒而言,在相同體系下,樣本雜質(zhì)越少,DNA的提取質(zhì)量就越高。以GNT系列的血液DNA提取試劑盒為例,如果是以全血為樣本,通常每個樣本加入的血液量為200ul,得率穩(wěn)定在3-8ug;但若是進(jìn)行病毒核酸提取,應(yīng)血清為樣本,每個樣本加入的血清量應(yīng)為150~200ul,相比于血液試劑盒的體系,血清試劑盒的提取效率會提高30%甚至更多??紤]實驗?zāi)康模?jǐn)慎選取樣本,會獲得更好的實驗結(jié)果。

 

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