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DNA瓊脂糖凝膠電泳出現(xiàn)拖尾的原因
點擊次數(shù):798 更新時間:2022-04-14

  原因有以下:

1、 可以考慮是不是樣品不純,目的產(chǎn)物與雜帶相差不大,所以要多跑一段時間才有尾巴。參考marker,marker應(yīng)該不會有。如果有的話說明配膠有問題。

2 、瓊脂糖檢測DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚藍(lán)便可,注意上樣濃度;

3、可能是原液濃度太大造成的;

4、可能DNA已降解。

5、在提取前對樣品進行一定的脫腐處理呀。很簡單。有一種TENP buffer,文獻中查的到的。

6、 DNA降解避免核酸酶污染。

7、 DNA上樣量過多,可以減少凝膠中DNA上樣量。

8、 所用電泳條件不合適,可以將電泳時電壓不應(yīng)超過20V/cm,溫度<30℃,巨大DNA鏈,溫度應(yīng) <15℃,核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力。

9、 DNA樣含鹽過高,可以在電泳前通過乙醇沉淀去除過多的鹽。

10、 有蛋白污染,可以采用電泳前酚抽提去除蛋白。

11、 DNA變性,電泳前勿加熱,用20mM NaCl緩沖液稀釋DNA

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