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液相使用小雷區(qū),趕緊來避開!
點(diǎn)擊次數(shù):1211 更新時間:2022-04-27
  液相操作中,有一些小細(xì)節(jié)上的誤操作在精益求精的實(shí)驗室人看來是要盡可能避免的,細(xì)節(jié)雖小,影響很大。遠(yuǎn)慕生物這就帶各位小伙伴們看一看,這些錯誤你們有犯過嗎?犯過不怕,記得改正哦~
 
  加入有機(jī)相之后再測量流動相的PH值
 
  作為液相色譜的基礎(chǔ),流動相的各項參數(shù)是保障實(shí)驗質(zhì)量的重中之重,特別是PH值。通常情況下對流動相PH值的測量是測量水相中的PH值參數(shù),而在加入有機(jī)相后PH測量的PH值是會產(chǎn)生誤差的。因為每一次加入的有機(jī)相并不能保證*的同質(zhì)同量,從而影響實(shí)驗的準(zhǔn)確度。
 
  測量流動相的PH值,是測量水相中的PH值參數(shù)。有機(jī)相加入之后PH值參數(shù)的測量就和之前有誤差。
 
  緩沖鹽使用不當(dāng)
 
  在流動相中,加入緩沖鹽可以控制和修正流動相中的PH值變化。樣品的機(jī)制,空氣中的CO2等氣體以及水中的雜質(zhì)都能夠造成流動相PH值變化進(jìn)而影響樣品的保留、峰形、峰面積參數(shù)。而每一種緩沖鹽都只能在一定的PH值范圍內(nèi)提供了最佳的pH穩(wěn)定性。而在這個范圍外,該緩沖鹽在抵抗pH值變化方面是無效的。所以需要在流動相中加入合適的緩沖鹽,要么在正確的范圍內(nèi)使用緩沖鹽,要么選擇一個能夠*覆蓋所需pH值的緩沖鹽。
 
  最后,緩沖鹽的添加也是具有一定的要求的,如果將水相的緩沖溶液加入到有機(jī)相中,會大大增加緩沖鹽析出的風(fēng)險。緩沖鹽的析出在初期可能并不明顯,但會對儀器的各個部件都會產(chǎn)生一定影響。長此以往不僅會導(dǎo)致實(shí)驗結(jié)果不準(zhǔn)確,更會有可能導(dǎo)致儀器損傷甚至損壞。
 
  直接用純有機(jī)溶劑沖系統(tǒng)
 
  如果之前的方法在B通道使用緩沖溶液,而這次沒有經(jīng)過調(diào)查就直接在B通道使用了純的有機(jī)溶劑,那么就會造成該通道緩沖鹽析出、出現(xiàn)堵塞等風(fēng)險。
 
  僅使用超聲來給流動相脫氣
 
  超聲脫氣有一定的脫氣作用,但*脫氣的效果并不理想。
 
  所以在此建議使用真空脫氣機(jī)進(jìn)行在線脫氣。
 
  梯度洗脫時從流動相比例從0%開始
 
  現(xiàn)在的液相色譜能夠非常高效的進(jìn)行在線脫氣和流動相混合。但是將梯度洗脫比例從0%開始,會有比較大的出現(xiàn)氣泡和沉淀的風(fēng)險。
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