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淺談蛋白質(zhì)提取純化的這幾種方法
點(diǎn)擊次數(shù):330 更新時(shí)間:2022-06-14

  蛋白質(zhì)的分離純化在生物化學(xué)研究應(yīng)用中使用廣泛,要利用不同蛋白間內(nèi)在的相似性與差異,利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質(zhì)的污染,而利用各蛋白質(zhì)的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。

 

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根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度不同,蛋白質(zhì)的分離純化可分為鹽析法和等電點(diǎn)沉淀法。鹽析一般是指溶液中加入無(wú)機(jī)鹽類而使溶解的物質(zhì)析出的過程。如:向某些蛋白質(zhì)溶液中加入某些無(wú)機(jī)鹽溶液后,可以降低蛋白質(zhì)的溶解度,使蛋白質(zhì)凝聚而從溶液中析出。這是一種物理變化,可復(fù)原。

等電點(diǎn)沉淀法是利用蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)溶解度最/低而各種蛋白質(zhì)又具有不同等電點(diǎn)的特點(diǎn)進(jìn)行分離提取的方法。在等電點(diǎn)時(shí),蛋白質(zhì)分子以兩性離子形式存在,其分子凈電荷為零(即正負(fù)電荷相等),此時(shí)蛋白質(zhì)分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥,分子相互之間的作用力減弱,其顆粒極易碰撞、凝聚而產(chǎn)生沉淀,所以蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí),其溶解度最小,最易形成沉淀物。等電點(diǎn)時(shí)的許多物理性質(zhì)如黏度、膨脹性、滲透壓等都變小,從而有利于懸浮液的過濾。

需要注意的是,不同的蛋白質(zhì),具有不同的等電點(diǎn)。在生產(chǎn)過程中應(yīng)根據(jù)分離要求,除去目的產(chǎn)物之外的雜蛋白;若目的產(chǎn)物也是蛋白質(zhì),且等電點(diǎn)較高時(shí),可先除去低于等電點(diǎn)的雜蛋白。同一種蛋白質(zhì)在不同條件下,等電點(diǎn)不同。

 

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