昆蟲(chóng)細(xì)胞是主要提取來(lái)自昆蟲(chóng)的一類(lèi)真核細(xì)胞。通過(guò)培養(yǎng)制造宿主的病毒,可以引起昆蟲(chóng)流行病,但對(duì)人畜和植物無(wú)害,因而可作病毒殺蟲(chóng)劑,還可以生產(chǎn)某些藥用蛋白。細(xì)胞培養(yǎng)瓶是培養(yǎng)昆蟲(chóng)細(xì)胞常用的一種細(xì)胞培養(yǎng)耗材,那么在培養(yǎng)昆蟲(chóng)細(xì)胞時(shí)需要注意哪些問(wèn)題呢?
1、溫度與環(huán)境:昆蟲(chóng)細(xì)胞一般應(yīng)該在27℃、非濕化的環(huán)境中培養(yǎng),建議不要進(jìn)行二氧化碳交換,所以細(xì)胞培養(yǎng)瓶盡量選擇密閉的蓋子。
2、培養(yǎng)基:不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基的需求也有所差異,應(yīng)該根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)特性,選擇昆蟲(chóng)細(xì)胞專(zhuān)用的培養(yǎng)基。
3、貼壁昆蟲(chóng)細(xì)胞:細(xì)胞密度低于匯合狀態(tài)的20% 時(shí),細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)受到抑制。健康狀態(tài)的細(xì)胞是對(duì)數(shù)期收獲的細(xì)胞,所以在傳代時(shí)應(yīng)選擇對(duì)數(shù)期進(jìn)行。但是,如果培養(yǎng)的是強(qiáng)貼壁性昆蟲(chóng)細(xì)胞,則應(yīng)在細(xì)胞達(dá)到匯合狀態(tài)或者剛剛開(kāi)始從培養(yǎng)瓶底部脫離時(shí)進(jìn)行傳代,因?yàn)榇藭r(shí)細(xì)胞容易脫離。
4、貼壁昆蟲(chóng)細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)條件下,昆蟲(chóng)細(xì)胞與基質(zhì)貼附非常牢固,需要花費(fèi)較大力氣才能使其脫落。要使細(xì)胞脫落,可以采用拍掌的動(dòng)作快速振搖一下細(xì)胞培養(yǎng)瓶。為了避免污染,進(jìn)行此操作前必須蓋緊蓋子。
5、懸浮培養(yǎng):一些昆蟲(chóng)細(xì)胞系可能需要一定的過(guò)程來(lái)適應(yīng)懸浮培養(yǎng)。進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時(shí)無(wú)需更換培養(yǎng)基,定期傳代時(shí)需要吸出細(xì)胞懸液,然后加入適量培養(yǎng)基,將細(xì)胞稀釋到適當(dāng)?shù)拿芏?。添加新鮮培養(yǎng)基后可使細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)素達(dá)到完/全補(bǔ)充。
以上是細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)昆蟲(chóng)細(xì)胞需要注意的五個(gè)方面,此外還要注意盡量不要?jiǎng)×覔u晃細(xì)胞培養(yǎng)瓶,避免對(duì)細(xì)胞造成損傷。