細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象有三種:混濁生長(zhǎng)、沉淀生長(zhǎng)、菌膜生長(zhǎng)(表面生長(zhǎng))
1、混濁生長(zhǎng):大多數(shù)細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖后均勻渾濁。如大腸埃希菌、志賀菌等。
2、沉淀生長(zhǎng):少數(shù)鏈狀排列的細(xì)菌如鏈球菌,炭疽芽孢桿菌等則呈沉淀生長(zhǎng)。
3、菌膜生長(zhǎng)(表面生長(zhǎng)):枯草芽孢桿菌、結(jié)核分歧桿菌和銅綠假單胞菌等專性需氧菌一般呈表面生長(zhǎng),常形成菌膜。
細(xì)菌培養(yǎng)常見的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法
(一)培養(yǎng)基
培養(yǎng)基是供細(xì)菌生長(zhǎng)用的,由人工方法將多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)根據(jù)各種細(xì)菌的需要而組合成的混合營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。
培養(yǎng)基的基本成分有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、凝固物質(zhì)、抑制劑和指示劑。常用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有:蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、各種糖類、血液、無機(jī)鹽、雞蛋和動(dòng)物血清、生長(zhǎng)因子等。最/常用凝固物質(zhì)為瓊脂100ml培養(yǎng)基中加入2~2.5g瓊脂可制成固體培養(yǎng)基;100ml培養(yǎng)基中加入0.3~0.5g瓊脂可制成半固體培養(yǎng)基。有時(shí)也使用明膠、卵白蛋白、血清等作為賦形劑。常用的抑制劑有膽鹽、煌綠、玫瑰紅酸、亞硫酸鈉、亞硒/酸鈉、一些染料和某些抗生素。培養(yǎng)基中加入的指示劑有酚紅、中性紅、甲基紅、酸性復(fù)紅、溴甲酚紫、溴麝香/草酚藍(lán)等酸堿指示劑和美藍(lán)作為氧氣指示劑。
根據(jù)其形狀分為固體、液體和半固體培養(yǎng)基;按用途可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、厭氧培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;按成分可分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。
(二)細(xì)菌的培養(yǎng)方法
普通培養(yǎng)法 普通培養(yǎng)法是指需氧菌或兼性厭氧菌等在普通大氣條件下的培養(yǎng)方法,又稱需氧培養(yǎng)法。若用明膠培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌,應(yīng)22℃培養(yǎng)。
二氧化碳培養(yǎng)法 某些細(xì)菌,如腦膜炎奈瑟菌、布魯菌等在初分離時(shí),需在5~10%二氧化碳環(huán)境中才能良好生長(zhǎng)。二氧化碳培養(yǎng)方法有以下幾種:二氧化碳培養(yǎng)箱、燭缸法、化學(xué)法。
厭氧培養(yǎng)法 常用方法有厭氧罐法、氣袋法和厭氧手套箱等。大多數(shù)厭氧菌的初代培養(yǎng)生長(zhǎng)較慢,故厭氧培養(yǎng)在37℃至少應(yīng)培養(yǎng)48h。如疑為放線菌則應(yīng)延長(zhǎng)72~96h。