一、平板劃線分離法 由接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料,在無(wú)菌平板表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線,微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少,并逐步分散開(kāi)來(lái),如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經(jīng)培養(yǎng)后,可在平板表面得到單菌落。
二、稀釋倒平板法 先將待分離的材料用無(wú)菌水作一系列的稀釋(如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …),然后分別取不同稀釋液少許,與已溶化并冷卻至 45 ℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合,搖勻后,傾入滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿中,待瓊脂凝固后,制成可能含菌的瓊脂平板,保溫培養(yǎng)一定時(shí)間即可出出菌落。如果稀釋得當(dāng),在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現(xiàn)分散的單個(gè)菌落,這個(gè)菌落可能就是由一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞繁殖形成的。隨后挑取該單個(gè)菌落,或重復(fù)以上操作數(shù)次,便可得到純培養(yǎng)。
稀釋涂布法:
優(yōu)點(diǎn):可以計(jì)數(shù),可以觀察菌落特征。
缺點(diǎn):吸收量較少,較麻煩,平板不干燥效果不好,容易蔓延。 一般用于平板培養(yǎng)基的回收率計(jì)數(shù)??!
稀釋混合平板法:
優(yōu)點(diǎn):可以計(jì)數(shù),吸收量為1ml,較方便。
優(yōu)點(diǎn):不能觀察菌落特征。 一般用于菌落總數(shù)的計(jì)數(shù)??!
平板劃線法:
優(yōu)點(diǎn):可以觀察菌落特征,對(duì)混合菌進(jìn)行分離!!
缺點(diǎn):不能計(jì)數(shù)