從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞,稱為原代細(xì)胞。這類細(xì)胞生命周期有限,在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞的生長空間,以保持細(xì)胞群中基因型和表型的一致性。
原代細(xì)胞生長緩慢,一般認(rèn)為,原代細(xì)胞培養(yǎng)的第1代和傳代到第10代以內(nèi)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。
原代細(xì)胞是指從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的細(xì)胞,稱為原代細(xì)胞。一般認(rèn)為,培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細(xì)胞生存、生長、繁殖和傳代,進(jìn)行細(xì)胞生命過程、細(xì)胞癌變、細(xì)胞工程等問題的研究。
細(xì)胞株(cell strain)是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)細(xì)胞中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的細(xì)胞稱為細(xì)胞株。一般認(rèn)為,細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。
細(xì)胞系(cell line)是原代細(xì)胞經(jīng)傳代成功后即為細(xì)胞系。泛指一般可能傳代的細(xì)胞。其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無限細(xì)胞系,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細(xì)胞系。大多數(shù)二倍體細(xì)胞為有限細(xì)胞系。由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱為有限細(xì)胞系(finite cell line), 如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cell line), 培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。人類腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。
原代細(xì)胞與細(xì)胞系該如何選?
原代細(xì)胞生長緩慢,一般認(rèn)為,原代細(xì)胞培養(yǎng)的第1代和傳代到第10代以內(nèi)統(tǒng)稱為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長會(huì)出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去,這些存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代,這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。當(dāng)細(xì)胞傳至50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)",這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),從而可能無限制地傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱為細(xì)胞系。
細(xì)胞系因其容易培養(yǎng)、種類多、產(chǎn)量可觀的優(yōu)點(diǎn)一直是細(xì)胞水平研究的Shou選,且價(jià)格相對(duì)低廉,但細(xì)胞系“價(jià)廉卻不一定物美"。研究發(fā)現(xiàn),細(xì)胞系在連續(xù)培養(yǎng)的過程會(huì)不斷發(fā)生突變,長時(shí)間的多次傳代可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞系的基因型和表型都發(fā)生變化,從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。例如有研究報(bào)道,HEK293經(jīng)腺病毒轉(zhuǎn)染后得到的細(xì)胞更接近未成熟神經(jīng)元細(xì)胞;MDA-435作為乳腺癌細(xì)胞被廣泛用于各種研究,但近年來越來越多證據(jù)表明其可能為一種黑色素瘤細(xì)胞。
原代細(xì)胞則不存在這些問題,雖然原代細(xì)胞分離和培養(yǎng)的成本可能相對(duì)更高,但原代細(xì)胞作為更接近體內(nèi)環(huán)境的研究模型,可讓你的研究結(jié)論更加接近“事實(shí)",且原代細(xì)胞的使用可減少動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所需的成本開支。另外在某些人體體內(nèi)無法進(jìn)行的實(shí)驗(yàn),原代細(xì)胞因其高度保持了在體內(nèi)的生物學(xué)特性,可在一定程度解決這個(gè)問題。
由于永生化的細(xì)胞系與體內(nèi)組織細(xì)胞的生物特性相差甚遠(yuǎn),導(dǎo)致許多生理和病理的過程難以重復(fù),近年來,原代細(xì)胞正逐步成為細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的Shou選工具,為疾病機(jī)制、藥物研發(fā)等提供了高質(zhì)量的模型。但不可能否認(rèn)的是,細(xì)胞系在科研中的地位仍十分重要,例如在標(biāo)準(zhǔn)化方案的確立上細(xì)胞系是良好的工具,某些需要大量細(xì)胞的研究如全基因組遺傳篩選,由于原代細(xì)胞數(shù)量有限且對(duì)培養(yǎng)條件要求苛刻,細(xì)胞系也是第1選擇。