麥?zhǔn)媳葷峁苁荕cFarland發(fā)明的一種用于微生物比濁的不同濁度的標(biāo)準(zhǔn)濁度管。具體的配制方法是根據(jù)硫酸和氯化鋇的比例來定的,有表可查,這樣不同比例生成的硫suan鋇沉淀的濃度不同,且都有定值。
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管 號(hào) (McFarland) | 0.5 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
0.25%BaCl 2 ( ml ) | 0.2 | 0.4 | 0.8 | 1.2 | 1.6 | 2.0 |
1%H 2 SO 4 (ml) | 9.8 | 9.6 | 9.2 | 8.8 | 8.4 | 8.0 |
細(xì)菌的近似濃度 ( × 10 8 /ml) | 1 | 3 | 6 | 9 | 12 | 15 |
操作方法:
1、輕搖標(biāo)準(zhǔn)試管。
2、無菌操作將被測(cè)定的肉湯培養(yǎng)物加到與標(biāo)準(zhǔn)管相同直徑(大?。┑臒o菌試管中。
3、以無菌操作向被測(cè)定試管加入無菌生理鹽水(NaCl),直到濃度與所要求的標(biāo)準(zhǔn)管的濃度相同。
使用技巧:
1、直接用眼睛看(需要經(jīng)驗(yàn),誤差較大)。
2、找張白紙,打上平行直線,然后看(如圖示,利用光在不同濃度液體折射不同)。
注意事項(xiàng):
1、如果測(cè)定的肉湯培養(yǎng)物不澄清,由培養(yǎng)物的值減去未接種培養(yǎng)基的值來校正細(xì)菌濃度。4號(hào)管(肉湯培養(yǎng)物)-1號(hào)管(孵育過的未接種的肉湯管)=3號(hào)管(校正讀數(shù))。
2、如果肉湯顏色很深,把未接種試管放在標(biāo)準(zhǔn)管的后面讀數(shù)即可。
編者注:
1、測(cè)定好的細(xì)菌,最好做一下梯度稀釋涂布計(jì)數(shù)。
2、此濃度是對(duì)應(yīng)的大腸桿菌的濃度,如果是其他細(xì)菌,會(huì)有一定的差別,但編者做過的幾個(gè)菌差別都在一個(gè)數(shù)量級(jí)之內(nèi),適合于普通實(shí)驗(yàn)。
3、此種方法測(cè)定的準(zhǔn)確性不是很高,如果是對(duì)細(xì)菌數(shù)量要求較精確的,請(qǐng)用紫外分光光度計(jì)。