抗體保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體的活性和使用效果!如果抗體保存得當(dāng),大部分抗體活性都可以維持?jǐn)?shù)月甚至數(shù)年。以abcam 抗體保存方法為主,同樣也可以應(yīng)用到其他絕大部分的抗體產(chǎn)品!
1. 收到抗體后請務(wù)必在12000rpm 離心1-5min 后再打開管蓋進行分裝和保存!質(zhì)優(yōu)的抗體使用非常特殊的儲存管,只有在12000rpm 離心1-5min 才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來。即使是在10000rpm 離心也會導(dǎo)致離心不wan全,導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象!
2. 對于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在 -20 度 or -80 度對絕大多數(shù)抗體來說,保存在-20 度是完wan全足夠了。沒有任何證據(jù)顯示保存在-80度 會有更多的好處!
(1) 分裝可以最da程度的降低反復(fù)凍融對抗體活性的損害,同時也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。
(2) 分裝的量以一次實驗用完為好,最少不能少于10ul 每份。因為分裝體積越小,抗體的濃度越可能會受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響
(3) 復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完,將剩余母液保存在4 度,避免再凍起來!
(4) 抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完,在4 度 盡量不要超過1 天。
(5) 絕對避免將抗體保存在自動除霜冰箱中。盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門上
3. 大部分抗體收到后4 度短暫保存1-2 周對抗體活性是沒有影響的。
如果抗體很快(1-2 周)會使用,推薦在4 度保存,這是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害。
如果要長期保存則最好是在-20 度 or -80 度。最關(guān)鍵的一點是要根據(jù)說明書推薦的方式來正確的保存抗體!但是,腹水形式的產(chǎn)品請在收到后立即凍起來!因為該類產(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長期在4 度保存會導(dǎo)致抗體的降解!
4. 大部分抗體的運輸條件:一般的運輸過程需要1-2 周的時間,所以是在4 度的條件下來完成的。4 度運輸最主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運輸,那么收到時抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運輸過程中絕對避免干冰運輸!
特殊抗體的保存條件:
1. 酶聯(lián)抗體:永遠保存在4 度,避免凍起來。否則會導(dǎo)致酶活性的下降或者喪失
2. 偶聯(lián)抗體:所有偶聯(lián)抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體,對光極為敏感,因此在所有的實驗階段也是要避光操作的!
3. IgG3 的同型對照:永遠保存在4 度,避免凍起來。因為如果出現(xiàn)凍融過程,該抗體非常容易形成多聚體無論是保存還是運輸,絕對避免反復(fù)凍融!反復(fù)凍融會導(dǎo)致抗體變性,導(dǎo)致多聚體形成,從而降低抗體的結(jié)合能力!
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